ВИБІР УМОВ ПРОБОПІДГОТОВКИ ЗРАЗКІВ КЛОЗАПІНУ З БІЛОГІЧНИХ РІДИН МЕТОДОМ РІДИННО-РІДИННОЇ ЕКСТРАКЦІЇ
DOI:
https://doi.org/10.11603/2312-0967.2026.3.16332Ключові слова:
клозапін, біологічні рідини, кров, сеча, УФ-спектрофотометрія, ізолюванняАнотація
Мета роботи – розробити методи виділення та визначення клозапіну із сечі та плазми крові за допомогою методу рідинно-рідинної екстракції, зокрема для цілей хіміко-токсикологічного аналізу (ХТА), та порівняти дані.
Матеріали та методи. У статті представлено методи екстракції клозапіну з модельних сумішей сечі та плазми крові за допомогою рідинно-рідинної екстракції. У роботі використовували зразки біологічних рідин, до яких вводили клозапін. Виділення препарату з крові та сечі здійснювали шляхом рідинно-рідинної екстракції із застосуванням хлороформу в лужному середовищі (рН 10). Для усунення ендогенних домішок попередньо проводили екстракцію сумішшю гексану та ізопропілового спирту (95:5) у кислому середовищі (рН 1). Під час підготовки зразків крові формені елементи осаджували за допомогою 10% розчину трихлороцтової кислоти. Кількісний аналіз клозапіну здійснювали методом УФ-спектрофотометрії після додаткового очищення методом тонкошарової хроматографії.
Результати та їх обговорення. Ідентифікацію клозапіну в отриманих екстрактах проводили за УФ-спектрами, які відповідали спектру стандартного розчину препарату в етилацетаті. Максимум поглинання спостерігався за довжини хвилі 261±2 нм. Для кількісного визначення використовували калібрувальну залежність (у = 0,0047х+0,0348), що демонструвала лінійність у концентраційному діапазоні 50,0–200,0 мкг/мл, а коефіцієнт кореляції (R2) = 0,9985. Ефективність вилучення клозапіну становила у середньому 33,02%±0,68 для крові та 71,48% ± 0,54 для сечі.
Висновки. Запропонований підхід до ізолювання клозапіну з біологічних рідин із використанням рідинно-рідинної екстракції. Показано, що УФ-спектрофотометричний метод може успішно застосовуватися для виявлення та кількісного визначення цієї речовини, що підтверджується отриманими валідаційними характеристиками. Результати дослідження можуть бути використані у судово-токсикологічній практиці, зокрема під час розслідування випадків отруєнь психотропними речовинами.
Посилання
1. Haddad PM, Sharma SG. Treatment‑resistant schizophrenia: What role for clozapine. Acta Psychiatr Scand Suppl. 2017:20(433):5–15. DOI: 10.1185/03007999709113338. DOI: https://doi.org/10.1185/03007999709113338
2. Sernyak MJ, Rosenheck RA. Management of side effects in patients treated with clozapine. J Clin Psychiatry. 2013:64(10):25–30. DOI: 12.1185/03007999709345688.
3. National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Summary for CID 5486971, Pregabalin. PubChem. Available from: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5486971.
4. Sernyak MJ, Rosenheck RA. Management of side effects in patients treated with clozapine. J Clin Psychiatry. 2013:64(10):25–30. DOI: 10.1177/2045125314566808. DOI: https://doi.org/10.1177/2045125314566808
5. State Pharmacopoeia of Ukraine. 2nd ed. Supplement 4. Kharkiv: State Enterprise “Ukrainian Scientific Pharmacopoeial Center for the Quality of Medicinal Products”. 2020. 600 p.
6. Hasan A, Falkai P, Wobrock T, Lieberman J, Glenthøj B, Gattaz W. et al. Clozapine: An updated overview of pharmacogenetic biomarkers, risks, and safety. Brain Sci. 2020:10(11):840. DOI: 10.1038/s41397-022-00281-9. DOI: https://doi.org/10.3390/brainsci10110840
7. Myles N, Myles H, Xia S, Large M, Kisely S, Galletly C. et al. Meta-analysis examining the epidemiology of clozapine-associated neutropenia. Acta Psychiatr Scand 2018:138.101–9. DOI: 10.1111/acps.12898. DOI: https://doi.org/10.1111/acps.12898
8. Dawson JL, Sluggett JK, Schumann JL, Procter NG, Bell J S. Fatal poisonings involving clozapine: A 16-year review of Australian coronial investigations. Australian & New Zealand Journal of Psychiatry. 2022:56(10): 1121–30. DOI: 10.1177/0004867421998788. DOI: https://doi.org/10.1177/0004867421998788
9. Chiappini S, Schifano F, Corkery JM, Guirguis A. Focus on clozapine withdrawal- and misuse-related cases as reported to the European Medicines Agency (EMA) Pharmacovigilance Database. Brain Sciences, 2020:10(2):105–10. DOI: 10.3390/brainsci10020105. DOI: https://doi.org/10.3390/brainsci10020105
10. Tosihiro S, Masato S, Yuji S. Development of a methodfor simultaneous analysis of clozapine and its metabolites in human plasma using tandem mass spectrometry with liquid chromatography/electrospray ionization with a linear range controlled by collision-induced dissociation at the source. 2021:35(7):e5094. DOI: 10.1002/bmc.5094. DOI: https://doi.org/10.1002/bmc.5094
11. Hrichi H, Kouki N, Elkanzi N. Chromatographic Methods for the Analysis of the Antipsychotic Drug Clozapine and Its Major Metabolites: A Review. Journal of Chromatographic Science. 2025:63(3):132–40. DOI: 10.1093/chromsci/bmae016. DOI: https://doi.org/10.1093/chromsci/bmae016
12. Mircea-Alexandru Comaneescu, Dalia-Simona Miron, Flavian-Stefan Radulescu. A simple HPLC-DAD method for therapeutic monitoring of clozapine and related metabolites in human plasma and urine samples. Molecules. 2024:29(21),5039; https://doi.org/10.3390/molecules29215039. DOI: https://doi.org/10.3390/molecules29215039
13. Xiong J, Tian L, Shen X, Huang C. Comparison of the applicability of electromembrane extraction and liquid-phase microextraction for extraction of non-polar basic drugs from different biological samples: Using clozapine as the model analyte. Journal of Separation Science. 2024:47(3):e2300745. DOI: 10.1002/jssc.202300745.
14. Kabarkos-Fernandez I, Alvarez-Freire M, Tabernero-Duque A. Quantitative determination of clozapine inplasma using an environmentally safe method. Microchemical Journal. 2022:180(4),145–53. DOI: 10.1016/j.microc.2022.107612. DOI: https://doi.org/10.1016/j.microc.2022.107612
15. Xiong J, Tian L, Shen X, Huang C. Comparison of the applicability of electromembrane extraction and liquid-phase microextraction for extraction of non-polar basic drugs from different biological samples: Using clozapine as the model analyte. Journal of Separation Science. 2024:47:134–8. DOI: 10.1002/jssc.202300745. DOI: https://doi.org/10.1002/jssc.202300745
16. Smityukh M. Toxicological characterization and methods for isolating clozapine from biological fluids suitable for chemical-toxicological analysis. Master’s thesis. Ternopil: I. Horbachevsky Ternopil National Medical University; 2026. 55 p. [in Ukrainian].
17. Terninko II. Khimiko-toksykolohichne doslidzhennia leponeksu [Chemical-toxicological investigation of Leponex]. Extended abstract of Candidate of Pharmaceutical Sciences dissertation. Kharkiv; 2003. 20 p. [in Ukrainian].
Завантаження
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Ця робота ліцензується відповідно до ліцензії Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі
. - Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
